Dextrose agar kentang (PDA) adalah medium semisolid tujuan umum yang digunakan untuk mengkultur kulat. Ia sering digunakan untuk mengasingkan, mengembangkan dan mengekalkan spesies pembentuk cendawan. Hidangan petri yang sedia dibuat atau tiub ujian yang mengandungi PDA boleh dibeli, atau PDA dengan cepat boleh menggunakan premix komersial. Walau bagaimanapun, tidak sukar untuk membuat versi yang mudah dan berkesan dari awal dengan kos yang sedikit.
kredit: Zedcor Penuh Milik / PhotoObjects.net / Getty ImagesMenyediakan Ekstrak Kentang
Langkah 1
Letakkan kentang dalam periuk dengan kira-kira 1.2 liter air paip dan rebus di atas dapur selama 1 jam.
Langkah 2
Keluarkan panci dari panas dan biarkan cecair sejuk sehingga ia dapat dikendalikan dengan selesa (kira-kira 10 minit).
Langkah 3
Tuangkan ekstrak kentang cair melalui penapis atau cheesecloth dan kumpulkan dalam bekas lain.
Menyediakan Medium
Langkah 1
Tambah dextrose dan agar hingga 1 liter air ekstrak kentang.
Langkah 2
Uji pH larutan dengan kertas ujian pH atau meter pH.
Langkah 3
Jika pH berada di atas 6.5, laraskannya dengan menambahkan satu titis penyelesaian asid hidroklorik pada satu masa dan ujian semula.
Langkah 4
Sekiranya pH berada di bawah 6, laraskannya dengan menambah satu titisan penyelesaian natrium hidroksida pada satu masa dan ujian semula.
Pensterilan
Langkah 1
Bincangkan medium dengan mudah dan bahagikannya ke dalam kumpulan yang lebih kecil 250 mL yang dicurahkan ke dalam empat 500 mL kalori (Nota: setiap kelalang mesti tidak lebih daripada separuh penuh untuk mengelakkan mendidih).
Langkah 2
Sampulkan setiap kepingan dengan sekeping foil aluminium longgar, jadi kerajang tidak akan jatuh, tetapi tidak membuat meterai yang ketat.
Langkah 3
Letakkan kalis dalam periuk tekanan.
Langkah 4
Mengendalikan periuk tekanan mengikut arahan pengilang untuk mensterilkan PDA pada 121 darjah C (250 darjah F) pada tekanan 103,421 Pascal (15 PSI) selama 15 minit.
Langkah 5
Matikan periuk tekanan dan biarkan ia kembali ke tekanan atmosfera, kemudian keluarkan cecair dan biarkan ia sejuk sehingga ia dapat dikendalikan.
Menuangkan Medium
Langkah 1
Selaraskan hidangan petri steril di permukaan rata.
Langkah 2
Sebaik sahaja kuali telah disejukkan untuk mengendalikan suhu, tetapi sebelum medium mula menguatkan, genggam satu kepingan dengan satu tangan dan keluarkan dan ketatkan penutup foilnya dengan tangan yang lain.
Langkah 3
Untuk setiap hidangan petri, angkat penutup dengan satu tangan, dengan cepat mengisi separuh dengan PDA cecair, dan ganti tudung.
Langkah 4
Ulangi Langkah 3 di atas sehingga semua petri dished diisi.
Langkah 5
Jika terdapat apa-apa PDA yang tersisa, longgar pulih kelopak dengan penutup foil asalnya, biarkan ia sejuk dan padat, ketatkan penutup foil dan simpan dalam peti sejuk.
